aCGH – Screening Cromozomial Complet

O nouă speranță în FIV: screening cromozomial complet – Metoda FISH

Care a fost una dintre metodele de Diagnostic Genetic Pre-implantare (PGD) aplicată cuplurilor care doreau să aibă un copil, dar nu puteau concepe sau avorta până în urmă cu puțin timp, a fost acum înlocuită de abordarea Comprehensive Chromosome Screening. În centrele noastre se realizează screening cromozomial complet.

Ce este scanarea completă a cromozomilor?

Comprehensive Chromosome Screening este o metodă care se efectuează înainte de transferul embrionilor în uter în aplicațiile de fertilizare in vitro, iar 24 de cromozomi diferiți pot fi examinați nu numai în ceea ce privește cromozomii selectați, ci și toți cromozomii disponibili cu metoda FISH.

Examinarea este efectuată folosind o tehnică numită Array Comparative Genomic Hybridization (numită pe scurt aCGH) folosind tehnologia microcipului, pe care se găsesc mii de particule aparținând cromozomilor umani.

Deoarece întreaga hartă cromozomală a embrionilor examinați cu această metodă poate fi văzută, multe tulburări cromozomiale care nu au putut fi detectate în trecut pot fi acum detectate în embrionii examinați.

Care sunt diferențele dintre această metodă față de metoda FISH, care este încă folosită de rutină?

Serviciul PGD oferit în multe clinici astăzi este realizat cu o tehnică numită „Fluorescent In Situ Hybridization” (FISH), iar în această tehnică, embrionii sunt de obicei examinați doar pentru cromozomi selectați (5, 7 sau 9).Deoarece cromozomii care urmează să fie examinați includ tulburări genetice care pot duce la naștere-vii sau probleme cromozomiale observate într-un ritm ridicat la avorturile precoce, 60-80% dintre tulburările cromozomiale care pot apărea la embrion pot fi detectate în aplicațiile PGD unde sunt 9 cromozomi scanati.

Cu toate acestea, deoarece restul de 20-40% nu poate fi detectat cu această tehnică, o tulburare cromozomială în acești cromozomi neexaminați poate sta în spatele eșecului unui embrion care a fost examinat pentru 9 cromozomi și s-a dovedit a fi “normal” să conceapă.

Deoarece toate regiunile cromozomiale pot fi văzute în detaliu cu un screening cromozomial complet, o creștere a ratelor de sarcină poate fi obținută prin transferul unui embrion care este normal în ceea ce privește 24 de cromozomi diferiți.

La întâlnirea Asociației Americane de Reproducere (ASRM) desfășurată la San Diego în octombrie anul trecut, s-a demonstrat că prin aplicarea acestei tehnici, femeile în vârstă de 40 de ani pot atinge o rată a sarcinii la fel de mare ca și femeile de 30 de ani.

Pe de altă parte, deoarece multe probleme legate de cromozomi care nu au putut fi detectate în trecut pot fi observate cu screening-ul cromozomial complet, șansa de a obține un embrion normal ca urmare a testului scade proporțional.

Cu alte cuvinte, la unii dintre pacienții noștri cărora li se va face acest test, embrioni normali s-ar putea să nu se găsească printre embrionii examinați și s-ar putea să nu se efectueze transferul de embrioni.

Din acest motiv, este un factor important pentru a crește șansa de sarcină dacă numărul de embrioni de examinat este peste un anumit număr.

Un embrion care se dovedește a fi normal, în ceea ce privește toți cromozomii – constituie întotdeauna o sarcină?

Riscul de a nu rămâne însărcinată din cauza unei tulburări cromozomiale sau de a pierde sarcina în stadiile incipiente este o situație care poate fi trăită la orice vârstă. Cu toate acestea, crește în mod deosebit în mod grav în cuplurile la care vârsta femeilor este peste 35 de ani.

Prin urmare, selecția embrionilor normali prin selecție genetică reduce semnificativ acest risc. Pe de altă parte, nu este suficient să obțineți un embrion normal din punct de vedere genetic pentru ca sarcina să apară.

Un țesut uterin sănătos este, de asemenea, un criteriu indispensabil pentru sarcină.Putem folosi medicamente cu doze mari la unii pacienți pentru a crește numărul de embrioni care pot fi examinați atât în aplicațiile FISH, cât și în cele cuprinzătoare de screening cromozomic.

Deși se pare că scopul este parțial atins, dozele mari de medicamente au de fapt un efect negativ asupra peretelui intrauterin de unde se va atașa embrionul și, în acest caz, chiar dacă la unele paciente se poate obține un embrion normal din punct de vedere genetic, sarcina poate să nu fi realizată din cauza unui țesut uterin neadecvat.

În acest caz, pentru a crește șansa, embrionii procesați genetic pot fi depozitați prin congelare, iar după ce organismul se odihnește timp de 1-2 luni după tratament, embrionii sunt dezghețați și transferați într-un mediu natural de uter. În acest fel, este posibilă creșterea ratelor de sarcină cu 8-10%.

Tehnica are riscuri sau posibilitate de eroare?

Când se menționează o greșeală, primul lucru care îmi vine în minte este amestecarea embrionilor sau a probelor într-un mediu de laborator. Atât practicile de rutină de Fertilizare in Vitro, cât și metodele de diagnostic genetic sunt efectuate ca urmare a unor etape care sunt controlate de mulți oameni în fiecare etapă.

Pe de altă parte, pentru a efectua screening-ul cromozomial complet, este necesară obținerea de embrioni prin utilizarea metodelor de Fertilizare in Vitro, la fel ca în aplicațiile FISH.

Ulterior, este necesar să se preleveze celule din embrionii obținuți pentru analiză genetică. Pentru această procedură de îndepărtare a celulelor, numită și biopsie embrionară, se efectuează microchirurgie pe embrioni folosind cea mai recentă tehnologie.

Deși riscul de deteriorare a embrionului după procedurile de biopsie este foarte scăzut, riscul încă există. Cunoștințele și expertiza embriologului care va efectua procedura sunt importante.

O altă problemă care poate fi considerată un risc atât în FISH, cât și în screening-ul cromozomial cuprinzător este riscul ca rezultatul genetic obținut în celula prelevată să nu reflecte adevărata structura genetică a embrionului în curs de dezvoltare.

Motivul principal pentru aceasta este că uneori celulele genetice normale și anormale continuă să se dezvolte în același mediu într-un embrion care se dezvoltă constant înainte de atașarea la uter.

Prin urmare, celula care urmează să fie luată pentru examinare și embrionul pot să nu aibă aceeași structură genetică într-o rată de 5-8% în perioadele timpurii de dezvoltare. Este posibil să se reducă această rată la sub 5% dacă o biopsie este efectuată mai târziu în procesul de dezvoltare a embrionului și în stadiul înainte de atașarea la uter (stadiul de blastocist) și celulele prelevate sunt examinate.

Cu toate acestea, în acest caz, există riscul ca fiecare embrion să nu ajungă în stadiul de blastocist. Este important ca centrul (dacă există) în care se va efectua screening-ul cromozomial complet, să facă o evaluare pe baza rezultatelor tratamentului anterior de FIV, atunci când decide când va fi efectuată prelevarea de celule.

Înghețarea embrionilor normali din punct de vedere genetic prezintă un risc, deși este scăzut. Din acest motiv, procesele de congelare-dezghețare ar trebui efectuate cu meticulozitate de către embriologi cu experiență.

Pierderea viabilității embrionilor care au avut deja un număr limitat de rezultate normale după decongelare afectează negativ tratamentul.